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AAT bioquest公司Amplite Colorimetric NAD/NADH Ratio Assay Kit

NAD/NADH比率檢測(cè)試劑盒 （比色法）Amplite 比色法NAD/NADH 比率試劑盒，提供一個(gè)比色法原理的檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞的總NAD/NADH，和NAD/NADH ratio的方法。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中，裂解液中NAD可以被NAD萃取液提取，通過酶反應(yīng)被轉(zhuǎn)化為NADH，然后利用NADH探針反應(yīng)，產(chǎn)生黃色染料，此染料可以在460nm處測(cè)吸收峰，或者加入增強(qiáng)劑后，可以檢測(cè)635nm吸收峰。染料產(chǎn)生顏色與細(xì)胞裂解液中NAD 或者NADH的濃度呈正比。

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【背景資料】：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸***酸(NADP+)是在細(xì)胞中找到的兩個(gè)重要的輔因子。NADH由NAD+加H還原得到，NAD+由NADH氧化而來。在腺嘌呤核苷酸的2’位通過酯鍵連接加上一個(gè)***酸基團(tuán)，構(gòu)成NADP。NADP用于生物合成代謝反應(yīng)中，例如脂肪酸和核酸的合成；需要NADPH作為還原劑。在葉綠體中，NADP作為氧化劑，在光合作用的初步反應(yīng)中非常重要。NADPH由光合作用產(chǎn)生，接著作為還原力用于光合作用中卡爾文循環(huán)中的生物合成反應(yīng)。傳統(tǒng)的NAD/NADH和NADP/NADPH的檢測(cè)是通過測(cè)定NADH或者NADPH在340nm處的吸光值。這種方法靈敏度低，且受嚴(yán)重干擾；因?yàn)闄z測(cè)在紫外光范圍內(nèi)，需要昂貴的石英微孔板。

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